Криопробирки и криоштативы

Криопробирки

Криопробирки

Криопробирки предназначены для хранения клеток, образцов и растворов. Выпускаются с двумя типами крышек – с внешней и внутренней резьбой. Криопробирка с внутренней резьбой имеет силиконовое кольцо. Предназначены для хранения образцов в жидком азоте при сверхнизкой температуре.

∗ Изготовлены из полипропилена
∗ «Юбка устойчивости»
∗ Стерилизованные гамма-облучением
∗ Апирогенные

Предупреждение:

Во время замораживания в пробирке образуется вакуум. Объем образующегося вакуума зависит напрямую от объема пробы (объема замораживаемого образца). При хранении пробирок в жидком азоте, жидкий азот может проникать в пробирки в объеме равном объему вакуума. При перемещении пробирок в камере и/ или оттаивании пробирок азот из жидкой фазы переходит в газообразную фазу и вызывает повышение давления внутри пробирки. В результате пробирка может разорваться. Использование пробирок с внутренней резьбой и силиконовым кольцом снижает риск повреждения пробирок. Кроме того, загрязненный азот, проникающий в пробирку, может также повредить клеточный материал образца. В целях безопасности, пробирки должны всегда храниться или в газообразном азоте или жидком.

При работе с пробирками всегда соблюдайте следующие правила безопасности:

∗ Храните пробирки только в газовой фазе.
∗ Заполняйте пробирки до нанесенной отметки.
∗ Плотно закрывайте крышку пробирки. Не закручивайте пробирку с усилием, не используйте для закручивания пробирки какие-либо подручные средства.
∗ Используйте защитную одежду, экран для защиты лица, очки и перчатки.
∗ Помещайте пробирки в контейнер с крышкой.

Пожалуйста, руководствуйтесь также внутренними инструкциями по технике безопасности!

Стандартный протокол по замораживанию клеток млекопитающих:

∗ Отмойте клетки с PBS.
∗ Поместите клетки в тот раствор, который прописан в выбранной методике (например, в раствор с ЭДТА, трипсином или раствор ЭДТА-трипсин).
∗ Остановите реакцию клеточной средой, содержащей сыворотку.
∗ Произведите подсчет клеток, используя тип камеры, указанный в методике.
∗ Отцентрифугируйте клетки (5 минут, 350 х g, комнатная температура), удалите супернатант.
∗ Ресуспендируйте клеточный осадок в культуральной среде, содержащей сыворотку. Содержание клеток в полученном образце должно быть около 107 / мл.
∗ Добавьте 1 объем среды для замораживания (например, следующего состава: 50% среды, 30% FCS, 20% DMSO). Конечное содержание клеток в образце должно быть 5 х 106 / мл.
∗ Наполните криопробирку до нанесенной отметки.
∗ Заморозьте образцы в специальном контейнере до температуры — 80OºС. Соблюдайте правила замораживания: 1OС/ мин. Клетки могут храниться при температуре -80ºС в течение 6 часов. В зависимости от типа клеток образцы могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких дней при температуре -80ºС.
∗ После этого поместите пробирки в криоконтейнер с жидким азотом.

Стандартный протокол по размораживанию клеток:

∗ Быстро достаньте пробирки из криоконтейнера с жидким азотом и поместите их водяную баню с крышкой (37ºС).
∗ После полного размораживания проб обработайте пробирки 70% спиртом. Высушите пробирки. Перенесите клеточную суспензию из криопробирки в пробирку объемом 15 мл .
∗ Добавьте культуральную среду и отцентрифугируйте пробирку (5 минут, 350 х g, комнатная температура).
∗ Удалите супернатант и ресуспендируйте клетки в подходящей по методике культуральной среде.
∗ Поместите клетки в культуральный флакон.

Криоштативы

Криоштативы

Криоштативы

∗ Для хранения 1,5 мл микропробирок или криогенных виал
∗ Прозрачный поликарбонат ( 80025,80081)
∗ Ламинированный катонный бокс ( 80181)
∗ Tемп. диапазон: -196 ~ +121 ° C ( 80025,80081)
∗ 3 цвета: синий, красный, желтый ( 80025,80081)